Pasos específicos para extraer clorofila mediante fragmentación celular utilizando un triturador de células ultrasónico

La trituradora de células ultrasónica utiliza el efecto de dispersión del ultrasonido en el líquido para crear cavitación, rompiendo así partículas sólidas o tejidos celulares en el líquido.
El desarrollo de la industria biológica ha aumentado los requisitos para los experimentos que utilizan pulverizadores de células ultrasónicos, como medir y controlar la temperatura de la muestra, mejorar el nivel de inteligencia del enfriamiento de muestras a baja temperatura y de toda la máquina, etc.
Los pasos específicos para extraer clorofila mediante trituración celular ultrasónica utilizando un triturador de células ultrasónico:
1. Centrifugue o filtre la muestra de agua e instale una membrana filtrante de fibra de acetato en el filtro de succión. Vierta un volumen cuantitativo de muestra de agua para la filtración y la presión negativa durante la filtración no debe ser demasiado alta (aproximadamente 50 kPa). Después de extraer la muestra de agua, continúe extrayendo durante 1-2 minutos para reducir la humedad en la membrana del filtro. Si se requiere un almacenamiento a corto plazo durante 1-2 días, se puede guardar en un refrigerador normal para congelarlo. Si se requiere un almacenamiento a largo plazo (30 días), se debe guardar en un refrigerador de baja temperatura (-20 grados).
2. Saque la membrana filtrante que contiene fitoplancton y séquela a baja temperatura en el frigorífico durante 6-8 horas. Córtalo en trozos pequeños con unas tijeras y colócalo en un tubo de centrífuga de 5ml o 10ml. Agregue 3-4 ml de acetona al 90% para sumergir los fragmentos por debajo del nivel del líquido. Coloque los fragmentos en un recipiente ultrasónico y utilice ondas ultrasónicas para romper las células de la muestra. (Comparación de experimentos en diferentes tiempos y frecuencias para facilitar la identificación del * tiempo y frecuencia de fragmentación para métodos unificados).
3. Centrifugar la muestra sometida a fragmentación celular mediante ultrasonido utilizando una centrífuga (3000-4000r/min) durante 10 minutos. Verter el sobrenadante en un matraz aforado de 5 ml o 10 ml. Diluir a 5ml o 10ml con acetona al 90% y agitar bien.
4. Coloque el sobrenadante en un espectrofotómetro y utilice un plato colorimétrico de trayectoria óptica de 1 cm para leer los valores de absorbancia en longitudes de onda de 750 nm, 663 nm, 645 nm y 630 nm, respectivamente. Utilice acetona al 90% como medida de absorbancia en blanco para corregir la absorbancia de la muestra.